实训管理
生物技术中心管理制度
发布时间：2012-10-19
作者：实训中心
发布者：实训中心
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生物技术中心学生实训规则
1、实训前认真预习实训要求，明确内容和方法，熟悉主要操作环节。
2、听从实训教师的指导，培养严谨、科学的实训态度，遵守生物技术中心各操作区的操作规程，不得违规操作。
3、认真学习仪器、设备的操作使用，认真完成实训项目。
4、注意安全，严防着火、灼伤、触电或药物中毒等事故发生。
5、实训期间保持安静、有序，不准中途退席。
6、实训项目结束后，严格按要求清洁或整理实训操作台，经教师或实验员检查合格后方可离开。
培养室操作规程
1、培养室一般温度保持在 25℃±2℃，湿度在70-80%范围内，光照1500lx～3000lx ，每天照射12-16h，具体条件根据培养作物的需要进行调控；若发生停电,来电后应及时启动空调，以免室内高温时间持续时间过长造成烧苗或室内温度降低造成冻苗；
2、室内必须定时做好消毒工作；
3、室内严禁吸烟和非工作人员出入，工作人员入内时必须消毒方可入室操作；
4、接苗后的培养基瓶口如发现密闭不严，应立即做相应处理，以减少瓶内与室内空气流通，控制气流传菌途径；
5、培养室中的污染苗应及时清除；
6、工作人员进入培养室的时间、离开时间、每次接种和继代培养的时间、培养物名称、数量、放置位置等需详细登记；
7、工作人员离开培养室时要注意关好门窗。
准备室操作规程
准备室的主要工作是：器皿的清洗、存放，试剂的称量，培养基的制备，培养基贮备液和药品的制备、存放。以下是准备室操作的有关规程。
1、进入准备室工作前，需换上洁净的工作服，换鞋。
2、玻璃器皿、塑料器皿使用前应彻底清洗，干燥后瓶口向下倒立放置；
3、制备贮备液和培养基时，应使用蒸馏水或无离子水，以及高纯度的化学试剂；
4、贮备液配置好后，应贮存于适当的塑料瓶或玻璃瓶中（见光易分解的贮备液应贮存于棕色瓶中），并置冰箱中保存。有毒的药品应妥善保管好。
5、使用贮备液前，必须轻轻摇动瓶子，如发现其中有沉淀悬浮或微生物污染，必须立即停止使用并将起淘汰；
6、培养基制备时，所称量的物质和液体应严格按标准进行；
7、制备固体培养基时，如果制备的培养基开始凝固，应将装有培养基的瓶加热，只有培养基为均匀的液体时才能分装；
8、所有装有培养基的培养瓶、玻璃瓶、贮存液、药品都应清楚的做上标记，以免经高压灭菌和长期贮藏难以识别；
9、工作人员离开准备室时，应做好相应的清洁工作，把药品、试剂、仪器、器皿放到指定的地点，同时做好相应的工作记录，如进入时间，离开时间，使用药品及份量，使用仪器及其工作状况，培养基的用途等等，关好门窗。
接种室操作规程
接种是组织培养成功的关键环节，为了消灭菌源，减少污染，保证接种的成功率，工作人员在操作时应遵守以下规则：
1、选择无污染的培养基，把经过高温灭菌的培养基置于缓冲室内 3-5d，挑除有污染的培养基，然后接种；
2、工作人员在进行接种操作前要穿好洁净的工作服，并用 75%的酒精擦洗双手至腕部；
3、在每次接种前，需将接种瓶及所需的一切器皿、用具、消毒液等放入工作台内，用紫外灯照射 20-30min;
4、操作过程中如果需要拿进母苗或其它器械，表面需用 75%酒精进行消毒；
5、在超净工作台上接种时，对所用镊子、剪刀、解剖刀、广口瓶封口处，每接一瓶苗就用接菌器具杀菌器及酒精灯外焰灭菌一次；镊子、剪刀上的锈斑和其它污物需彻底清理干净，刀片需及时更换；
6、用于消毒灭菌的酒精最好新配制，使用最多不能超过一周 ;
7、工作台上的接种瓶不要堆放过高，以免阻挡风力传送 ;
8、定时进行室内消毒，以杀灭空气中的菌源；
9、注意事项：
①工作人员在进行接种操作前一定要先关闭紫外灯，以免长时间受紫外灯的照射而灼伤皮肤，甚至引起皮肤癌；
②酒精灯点燃后，工作台内不能喷洒酒精消毒，以免引起火灾。
自动型压力蒸汽灭菌器操作规程
1、开盖：向左转动手轮数圈，直至转动至顶，使锅盖充分提起，拉起左立柱上的保险销，按箭头方向推开横梁移开锅盖。
2、通电：接通电源，将控制面板上的电源开关按至ON处。
3、加水：将水直接注入蒸发锅，观察控制面板上的水位灯，直至高水位（HIGH绿灯）亮时方可停止加水（每次使用前均需补足上述水位）。
4、堆放：将包扎的灭菌物品依次堆放在灭菌筐内，各包之间应留有一定的间隙，这样有利于蒸汽的穿透，提高灭菌效果。堆放灭菌包时应注意安全阀放汽孔的位置，不许任何物品堵塞放汽孔，必须保障其畅通放汽，否则因安全阀汽孔堵塞未能泄压，易造成锅体爆裂事故。
5、密封：将横梁推向左立柱内，将手轮向左旋转数圈，使锅盖向下压紧锅体，加力使锅盖与锅体充分密合，以确保密封开关处于接通状态。当联锁灯（绿灯）亮时，显示容器密封到位。
6、设定温度与时间：通电后控制面板上的数显窗灯亮，按动确认键开启设定窗内数显调整块，可上调或下调温度，所需温度设定完毕，须继续按动两次确认键进行数据的确认。再次按动确认键，将温度显示切换成时间显示状态，进行时间设定。
7、灭菌：当所需温度、时间设定完毕，灭菌器即进入自动灭菌循环程序，控制面板上的加热灯（绿灯）亮。对灭菌室上、中、下三点温度一致性要求高的灭菌物品，在灭菌时只需将排汽排水阀向左旋转开启少许，让少量的蒸汽不断排出，可达到灭菌室温度均衡的要求。
8、干燥：灭菌后需要迅速干燥的，须打开安全阀或将排汽排水阀向左旋至ON位置，让灭菌器内的蒸汽迅速排出。但是灭菌液体时严禁立即释放蒸汽，必须待压力表指针回归零位方可排放余汽，否则会导致液体沸腾使玻璃容器爆裂的事故。
9、启盖：向左转动手轮数圈，直至转动到顶，使锅盖充分提起，拉起左立柱上保险销，推开横梁移开锅盖，即可取出灭菌物品
10、其他注意事项：
①针对灭菌指标要求不同的物品，切勿同时放在一起灭菌，以免造成损失。
②压力表使用日久后，压力指示不正确或不能回复零位，应及时予以检修，平时应定期与标准压力表相对照，若发现有偏差，应换上合格的新表。
③经常保持设备的清洁和干燥可延长其使用寿命，橡胶密封圈使用日久会老化，应定期更换。
④定期检查熔断器的可靠性，使用日久应及时更换，以保证设备的正常使用。
⑤应定期检查安全阀的可靠性，工作压力超过0.165Mpa时不起跳，需要更换合格的安全阀，旧阀不得继续使用。否则安全阀不工作，无法泄压导致锅内压力超标，会造成压力容器暴裂事故。
高压灭菌操作规程
1、高压灭菌锅使用前要水加到水位线；
2、将需灭菌的培养基或其它器皿放入灭菌锅内，关闭锅盖，打开电源，灭菌锅开始工作；
3、灭菌锅压力指针首次升至 0.05MPa时，打开放气阀放冷气，待压力降至零后关闭放气阀，使压力继续上升；
4、压力升至 0.15MPa（121℃）时，灭菌锅自动切断电源，此时开始记时，一般培养基灭菌20min，蒸馏水灭菌30min；
5、达到规定的灭菌时间后，关闭电源，让灭菌锅自然冷却；当压力指针降至 0.05MPa时，打开放气阀，蒸汽放尽后，放可开启锅盖。
6、注意事项
①汽未放尽前，不得开启高压锅；
②如果灭菌后的培养基在锅内不及时拿出，需在蒸汽放尽后将锅盖打开，切忌将培养基封闭在锅内过夜。
③压力表指针在0.05MPa以上时，不能过快放汽，以防止压力急速下降，液体滚沸，从培养容器中溢出。
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